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人干擾素γ檢測原理

更新時(shí)間:2025-08-04點(diǎn)擊次數(shù):60

Solarbio ELISA試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。將抗人IFN-γ單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本,標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人IFN-γ會與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗人IFN-γ抗體和辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,抗體會與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人IFN-γ發(fā)生特異性結(jié)合,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物TMB,若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的人IFN-γ,則HRP會使無色TMB變成不同深淺(正相關(guān))的藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會變成黃色;最后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),樣本中的人IFN-γ濃度與OD成正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中人IFN-γ的濃度。

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